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Kursinhalte

  • Inhalte
    Einführung und Wiederholung, Aufbau und Struktur der DNA, Basenpaarung, Basenanaloga, Replikationsrichtung, Genome und Genom-Größen, Aufbau von Genomen Beispiel Mensch, Komplexität von Genomen, Auswirkungen auf das Design des Experiments, sequenzunspezifischer und sequenzspezifischer Nachweis (SYBR Greeen, LUX(TM)-Primer Amplifluor Sunrise(TM)) und Sonden) Vergleich konventionelle PCR gegen real-Time PCR-Nachweis, Unterschiedliche Detektionsformate und Marktübersicht PCR-Geräte, PCR-Reagenzien: Einführung in die Fluoreszenzdetektion, unterschiedliche Polymerasen und ihre Anwendung, Vor und Nachteile unterschiedlicher Sondenformate: Hybridisierungssonden Hydrolysis-Sonden, Aufbau eines PCR-Labors, Kontaminationsrisiko und die Vermeidung, dUTP, PCR aus Literaturdaten, Optimierung einer PCR, Gradienten-PCR, Taguchi, verschiedene Hotstart-Ansätze, Touchdown-PCR, Aufbau einer neuen PCR aus Literaturdaten, Primerdesign, Überblick über die Primer-Design-Software, FastPCR-Software, Dokumentation von Amplikonen, Quantifizierungsstrategien: absolute und relative Quantifizierung, Kontrollen: interne Kontrolle, Positiv-Kontrolle Negativ-Kontrolle.

  • Experimente: Nachweis von Legionellen/Bakterien in Trinkwasserproben: DNA-Präparation, Etablierung und Optimierung der PCR, Ausschluss von Primer-Dimers von der datenerfassung, verschiedene Standard-Kurven, Vergleich mit verschiedenen Detektionsformaten.

  • Die Inhalte können nach Ihren Wünschen gestaltet werden.


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